实验原理:盲肠结扎穿孔术构建的动物模型,会发生起源于腹腔内的多菌感染灶,随后细菌进入血液循环,引发全身炎症反应,即脓毒症。该方法是构建脓毒血症的经典方法。
模型用途:在研究脓毒血症,脓毒症相关性脑病时可以通过盲肠结扎穿孔术来构建该疾病动物模型。在构建脓毒血症模型时,有些实验者会选择腹腔注射 LPS 来构建此模型,这种方法相比于盲肠结扎穿孔术更具简便性,但 LPS 注射进动物体内会被代谢,可能会造成模型不稳定的情况出现,而盲肠结扎穿孔术(CLP)通过手术的形式所构建的脓毒血症模型会具有更高的稳定性!
实验动物:采用选择健康雄性SD大鼠,7周龄,普通块料喂养,随意饮水,室温20-26℃,每日光照12-14h,术后分笼饲养。
材料与仪器:SD大鼠剃毛器,75% 酒精,碘伏,眼科剪,缝合线与针,直镊,弯镊,戊巴比妥钠,加热器,1ml 注射器,生理盐水,纱布。
步骤:
1. 称重麻醉:手术前动物需要禁食12小时,称重后按 40mg/kg剂量注射适量的戊巴比妥钠麻醉动物。
2. 术前准备:腹部朝上固定住动物以后,用推毛器去除动物腹部毛发,手术区域用75%医用酒精消毒一遍,再使用碘酒消毒一遍,手术要用到的器械提前浸泡酒精或高压消毒。
3. 盲肠结扎:将动物下腹正中打开 1cm 左右切口,找出盲肠,在盲肠远端与盲肠底部中间选择合适位置(结扎位置越靠近盲肠底部脓毒症的严重程度越高)结扎。
4. 盲肠穿刺:结扎后将针头从肠系膜向反肠系膜的方向进行盲肠穿刺(“贯穿式”)。
5. 挤出粪便:从穿刺的孔中挤出一滴粪便。
6. 缝合:将盲肠放回腹腔内,缝合腹膜与皮肤。
7. 术后护理:根据动物体重给予适量的生理盐水。将动物放在恒温加热器上保持体温,防止动物发生低体温休克导致死亡。
