一、实验设计核心要素

裸鼠选择常用品系：BALB/c-nu、NOD/SCID等，需根据肿瘤细胞类型选择免疫缺陷程度匹配的品系。

周龄与性别：通常选用4-6周龄雌性裸鼠。

饲养条件：SPF级环境，饲料、垫料及饮水需灭菌处理。

肿瘤细胞准备细胞来源：人源肿瘤细胞系（如A549、HCT116）或患者来源的异种移植（PDX）细胞。

细胞状态：接种前需处于对数生长期，活率>95%（可通过台盼蓝染色或流式细胞术检测）。

接种浓度：一般为1×10⁶-1×10⁷个细胞/mL，接种体积100-200 μL/只。

实验分组设计对照组：接种肿瘤细胞+溶剂（如PBS）。

实验组：接种肿瘤细胞+待测药物（需设置剂量梯度）。

样本量：每组至少6-8只裸鼠，以满足统计学要求。

二、操作关键步骤

接种部位选择常用部位：裸鼠右侧或左侧腋窝皮下（血供丰富，易于操作）。

操作要点：裸鼠固定：用拇指和食指轻轻提起背部皮肤，使其呈“鼓包”状。

注射角度：针头与皮肤呈30°角刺入，避免穿透肌肉层。

注射速度：缓慢推注，避免细胞悬液外渗。

接种后观察每日观察：裸鼠精神状态、活动度、体重变化及接种部位有无红肿、破溃。

肿瘤测量：从接种后第7天开始，用游标卡尺测量肿瘤长径（a）和短径（b），计算体积（V=0.5×a×b²）。

终止标准：肿瘤体积达1500-2000 mm³或裸鼠出现明显消瘦、活动减少时，需终止实验。

常见问题与解决方案

成瘤率低可能原因：细胞状态差、接种浓度不足、注射技术不当。

解决方案：优化细胞培养条件，增加接种细胞数，改进注射手法。

肿瘤生长不均一可能原因：细胞悬液浓度不均、注射体积差异。

解决方案：使用自动细胞计数仪，严格标准化接种流程。

裸鼠死亡可能原因：感染、肿瘤过大压迫内脏。

解决方案：加强饲养环境消毒，及时终止实验。

三、数据分析与结果解读

肿瘤生长曲线以时间为横轴，肿瘤体积为纵轴，绘制生长曲线。

统计分析：采用双因素方差分析（Two-way ANOVA）比较组间差异。

实验局限性

免疫缺陷背景裸鼠缺乏T细胞功能，但仍有NK细胞和巨噬细胞活性，可能影响部分免疫治疗药物的评价。

肿瘤微环境差异皮下成瘤模型无法完全模拟人体肿瘤的复杂微环境（如血管生成、免疫细胞浸润）。

转移能力有限皮下接种的肿瘤较少发生远处转移，如需研究转移，可考虑尾静脉注射或原位种植模型。