裸鼠肝原位成瘤是一种常用的肿瘤研究模型,通过将人肝癌细胞或组织直接移植到裸鼠肝脏中,模拟人类肝癌的生长和转移过程。以下是该模型的主要步骤和要点:
1. 实验准备:
l 实验动物:选择4-8周龄的SPF级Balb/c或nu/nu裸鼠,体重18-22g,雌雄均可。
l 细胞或组织准备:常用人肝癌细胞系如Huh-7、HepG2等,或新鲜肝癌组织。细胞需调整至适当浓度(如1×10^7 cells/mL),组织需切成1-2mm小块。
2. 手术操作:
l 麻醉:采用异氟烷或戊巴比妥钠进行麻醉。
l 消毒与开腹:腹部消毒后,沿腹中线或肋缘下切开皮肤,暴露肝脏89。
l 移植方法:
n 细胞悬液注射法:用微量注射器将细胞悬液(如20μL,含2×10^6个细胞)直接注射到肝脏左叶或右叶实质内,注意避免大血管。
n 组织块移植法:用眼科镊或针头在肝脏表面制造小切口或隧道,将肿瘤组织块植入肝实质内,确保组织与肝脏紧密接触0。
l 关腹与术后护理:移植完成后,逐层缝合腹壁,观察裸鼠苏醒情况,术后给予适当护理,保持环境清洁,自由进食饮水。
3. 模型监测与评估:
l 肿瘤生长监测:可通过超声、MRI或活体成像技术定期监测肿瘤生长情况,记录肿瘤体积和裸鼠体重变化。
l 人道终点判定:根据NIH指南,肿瘤体积不应超过裸鼠体重的10%,当裸鼠出现明显衰竭症状时应及时处死并进行病理分析。
l 病理分析:处死裸鼠后,取出肝脏和肿瘤组织进行HE染色、免疫组化等分析,评估肿瘤的生长、侵袭和转移情况。
通过以上步骤,可以成功建立裸鼠肝原位成瘤模型,为肝癌的发病机制研究和抗肿瘤药物筛选提供有力工具。




